Defiance erzählt die Geschichte vier jüdischer Brüder, die 1941 nach einem Überfall auf ihr Dorf in Polen durch die Deutsche Wehrmacht in die Wälder fliehen, um als Partisanen gegen die deutschen Besatzer zu kämpfen und ihre Landsleute vor der Vernichtung zu retten.
Bald schließen sich den Brüdern nicht nur Partisanenkämpfer an. Auch jüdische Flüchtlinge aus dem Umkreis finden Unterschlupf in ihrem notdürftigen Versteck. Deren Aufnahme in die Widerstandsgruppe spaltet jedoch die Brüdergemeinschaft.
Währenddessen gestaltet sich das Leben in der Natur als äußerst gefährlich. Die ständige Gefahr von der Deutschen Besatzung und einheimischen Kollaborateuren entdeckt zu werden setzt der Gruppe stark zu. Zudem quälen Hunger und die Kälte des gnadenlosen Winters die Gemeinschaft. Diese Zeit der Auflehnung und des Widerstands wir zum Prüfstein für alle Beteiligten...